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 Sujet du message: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 6:31 pm 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Bonjour à tous.
Je m'arrache les cheveux avec mes repiquages :(
Je contamine tout, je n'arrive pas à travailler dans la glove box.
Je recherche une hotte à flux laminaire horizontal de petite dimension.
Auriez-vous un plan pour en acheter une d'occasion ?
Merci d'avance !


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 8:03 pm 
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Inscription: Sam Mai 22, 2010 1:54 pm
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La méthode de repiquage ou les flasks en sont certainement la cause.

Pas certaine que ce soit plus facile sous hotte, à moins que tu aies dejà travaillé sous cet environnement :wink:

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 8:10 pm 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Eh oui, je travaille sous hotte tous les jours :bav: Je suis dans la CIV. Ca explique peut-être que je sois incapable de travailler entravée dans la glove box :?


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 8:21 pm 
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Inscription: Sam Mai 22, 2010 1:54 pm
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OK, ça sera plus simple pour toi sous hotte alors. N'empêche que si on fait ce qu'il faut en glovebox, on n'a quasiment pas de contamination, à condition que les flasks soient saines au départ.
c'est une autre façon de travailler :)

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 8:40 pm 
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Inscription: Jeu Mar 22, 2012 3:52 pm
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Ton problème vient peut-être de la stérilisation des boîtes. Investis sur une cocote des USA qui coûte environ 120 euros avec le port.
Ou, laisse plusieurs semaines reposer tes pots avant d'effectuer les repiquages.
Bonne soirée
fred

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Confucius


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Dim Aoû 25, 2013 10:11 pm 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Je suis sûre de n'avoir aucun problème avec les flask, elles datent de plusieurs semaines et zéro contam dans les boîtes neuves.
Je sais que la contam vient de la manipulation, parce que je n'arrive pas à travaille dans la glove box, donc je travaille à la flamme, et même avec 3 lampes à alcool ce n'est pas suffisant :(


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 6:41 am 
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Décris-nous tes manip, y a forcément un truc qui cloche.

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¤ A quoi ça sert d'avoir des ailes si tu ne peux pas sentir le vent sur ton visage ? ¤


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 9:34 am 
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Inscription: Mar Juil 10, 2007 1:51 am
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ion-ion a écrit:
donc je travaille à la flamme, et même avec 3 lampes à alcool ce n'est pas suffisant :(


Le problème vient probablement de là ;) Si ma mémoire est bonne, la flamme d'un lampe à alcool n'est pas assez chaude pour générer un cône de stérilité ;) Il faut du gaz ou les trucs électriques prévus à cet effet. Au tout début, je semais sur ma cuisinière à gaz avec pas mal de contamination certes, mais ça fonctionnait à peu près. Sinon il y a la technique qu'utilise Alain Brochard, une grande casserole d'eau bouillante avec une grille posée dessus et tu travailles dans le flux de vapeur ... J'ai testé et si tu as des lunettes de vue (comme moi) c'est ingérable avec la buée qui se dépose sur les verres :P

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 6:50 pm 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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:P Oui j'imagine bien, je porte des lunettes de temps en temps, mais la plupart du temps j'ai des lentilles. Je crois que je vais tester ta méthode, j'avais vu des photos.

Kaylane, je pense que le cône de stérilité est trop petit par rapport à la taille de ma boîte.
J'utilise des boîtes en plastiques avec une grande ouverture, et à mon avis, c'est là qu'est le problème, c'est que je ne peux pas maintenir toute l'ouverture + le couvercle dans la zone de stérilité.

M'en vais tester la casserole d'eau bouillante.
Après, si je n'ai pas de bons résultats, je ferais appel à Papa Noël :wink:


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 7:32 pm 
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A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! :hihihi:

J'ai toujours travaillé avec un simple aquarium posé sur le côté, sans flamme et je n'ai jamais eu que de très rares contaminations, uniquement sur les derniers flacons d'une série.
Donc, c'est bien au niveau de la manipulation elle-même qu'il y a un problème !

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 7:54 pm 
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Inscription: Mar Déc 28, 2010 8:34 am
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Philippe13 a écrit:
A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! :hihihi:

J'ai toujours travaillé avec un simple aquarium posé sur le côté, sans flamme et je n'ai jamais eu que de très rares contaminations, uniquement sur les derniers flacons d'une série.
Donc, c'est bien au niveau de la manipulation elle-même qu'il y a un problème !



+1

c'est pour ça que tu devrais nous décrire avec précision toutes les étapes

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Lun Aoû 26, 2013 8:45 pm 
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Ah voilà, tu ne nous avais pas tout dit. Tu travailles à la flamme. Perso j'utilisais un réchaud de camping, bleuet, et ça fonctionnait assez bien.
Le souci, effectivement c'est qu'il faut travailler avec des contenants à col étroit pour le semis à la flamme.

Paradoxalement par rapport à toi, je suis passé en glove box après, et j'y trouve un confort évident. Et une zone de stérilité bien plus sûre.
A la flamme, il faut travailler très près et c'est bien plus dangereux. :)

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Mar Aoû 27, 2013 7:52 am 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Alors, la manip en elle-même :
je nettoie mon plan de travail à l'alcool, les mains lavées + solution hydroalcoolique
je dispose 3 lampes à alcool en triangle
je flambe un bon moment une pince a bout plat que je laisse ensuite embout vers le haut dans le cône de stérilité d'une flamme
j'ouvre un bocal a repiquer dans le un cone de stérilité, je chope un pti tas de protocormes avec la pince. Je repose la pince embout vers le haut avec ses protocormes collés au bout pour pouvoir refermer le bocal.
J'ouvre un nouveau bocal et j'introduis les plantules.
Tout ça en flambant les cols à chaque fois.

Mais je pense que ça me vient pas de la pince, ou des plantules, parce que les contaminations se développent "a distance" des plantules, genre sur un côté, ou en plein milieu d'une partie de gélose stérile que je n'ai pas trifouillé avec ma pince.
donc je vais tester la casserole d'eau chaude pour laisser ma boite et son couvercle dans une zone de stérilité.

Qu'en pensez-vous?


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Mar Aoû 27, 2013 10:17 am 
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j'en pense que ça manque d'eau de javel :)


Je ne sais plus si tu avais acheté le kit chez moi ou non, mais si c'est le cas, relis bien la procédure.... Tu dois bosser sur un "lit" de javel.

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Mar Aoû 27, 2013 1:34 pm 
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Philippe13 a écrit:
A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! :hihihi:

Ouiiiii ! !
Et un jour, j'ouvrirai un super méga espace de vente, avec tout plein d'orchidées, et tous les orchidoux seront invités à l'inauguration, et le champagne coulera à flots...

Bon, allez, je redescends sur terre, et je vais tenter de repiquer mes derniers semis sans tout bousiller.

Je vais tester le lit de javel aussi, merci kaylane !


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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Mar Aoû 27, 2013 7:07 pm 
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ion-ion a écrit:
Philippe13 a écrit:
A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! :hihihi:

Ouiiiii ! !
Et un jour, j'ouvrirai un super méga espace de vente, avec tout plein d'orchidées, et tous les orchidoux seront invités à l'inauguration, et le champagne coulera à flots...

Bon, allez, je redescends sur terre, et je vais tenter de repiquer mes derniers semis sans tout bousiller.

Je vais tester le lit de javel aussi, merci kaylane !




Relis bien la procédure et suis tout étape par étape. Au pire, si un jour tu veux une hotte, je te vendrais une des miennes :ouin:

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 Sujet du message: Re: Recherche hotte
MessagePosté: Mer Aoû 28, 2013 6:32 am 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Kaylane a écrit:
Au pire, si un jour tu veux une hotte, je te vendrais une des miennes :ouin:

Ca, c'est pas tombé dans l'oreille d'un sourd !


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