Orchidouxdingues

J'ai fais quelques tests concernant les graines et méristèmes (de phalaenopsis) en culture sur gélose "maison" mais c'était vraiment pour m'exercer.
Bien entendu, comme toute débutante, mes expériences ont échouées car je n'ai ni les bons ingrédients ni la bonne technique pour réaliser tout ça.

Je sais que certains d'entre vous obtiennent de bon résultats en semence de graines d'orchidées donc voici ma question :

Est-il possible de nous faire une petite démonstration lorsque vous procéderez à nouveau à une manipulation "In vitro" ?

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il y a le sujet de Benoit (Poliben) qui traite de ça!! j'ai le même probleme en fait les 2 fois ou j'ai testé , au bout de quelques jours il y a prolifération de champignon, donc en fait probleme d'asseptie...

Hello

Merci Doudou de penser à moi Il y a effectivement mon mini reportage que j'ai tenté de faire sur le semi et la culture de méristem.
http://www.orchidouxdingues.info/viewtopic.php?f=5&t=12205&hilit=neofinetia

Qu'entends tu par démo ? Tu veux dire en live ? Sinon, on a évoqué avec Laurence la possibilité de rédiger un article pour l'Orchigazette du site ... mais comme je suis un gros flemmard je n'ai pas encore commencé ... depuis le mois de septembre Promis je vais me pencher dessus !

@+
Benoit

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Quelques orchidées Mise à jour : 15/05/13 Orchid-DB * Gestionnaire de collection multi-plateforme gratuit *

Ben tiens... j'attends qqch aussi

Poliben, j'avais déjà visualisé ton mini reportage, très interressant d'ailleurs
Mais je parle effectivement de démonstration en live pour voir véritablement toutes les étapes, de stérilisation, de préparation des graines...de fabrication de gélose et tout et tout....

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Pour la technique de base (mais utilisant une hotte sterile) de propagations a
partir de graines il y a le cours suivant en englais, illustre avec des photos:
http://www.amazon.com/gp/product/0972227008

Ca reste quand meme complique et pas quelque chose de faisable sur un coin de
cuisine mais pour ceux interesse, il y a toute la description des protocoles,
composition des milieux et meme temps moyen de murissement des gousses
pour pas mal d'especes.

Daniel

Alors je peux te conseiller d'aller voir ce site, j'ai commencé avec lui :

http://orchideenvermehrung.at/english/index.htm

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Ce site est vraiment très interressant...du coup j'ai fécondé un phal. pour refaire une tentative avec des graines
Je vais en profiter pour faire moi aussi un ptit reportage sur cet essai
J'ai 8/9 mois pour acheter le matériel necessaire...je pense que j'aurais assez de temps



Sur le web, l'anglais ne me dérrange pas car il y a les traductions mais pour un livre, même avec quelques notions d'anglais, je crains de ne pouvoir comprendre l'intégralité des textes

Merci pour vos réponses. On avance

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J'ai trouvé ces liens sur le web.
http://www.clivia.fr/catcom2.htm
http://pagesperso-orange.fr/orchidee_54/page/CIV/pageciv.html

Je pense que je vais me lancer dans l'aventure car j'ai une gousse de Phals qui va bientot être OK.

Questions pour Poliben :
- y-a-t-il un moyen simple de se rendre compte si des graines sont stériles ou pas, sans utiliser de loupe binoculaire (que je n'ai pas) ?
- ou achètes-tu tes milieux de culture (j'magine que tu ne les fais pas toi-même) ?

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Jean-Bruno

And in the end, the love you take is equal to the love you make.

pour les milieux de culture il y a : http://membres.lycos.fr/acroleine/

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Qui a déjà essayé ce kit ? Benoît peut-être ? Ca vaut la peine ou le prix est exagéré ?

moi il ne m'on jamais repondu....

Je ne sais pas si quelqu'un a déjà mentionné ce lien :
http://encyclo.free.fr/pages/in_vitro.htm

et celui la :
http://www.aaoe.fr/post/2006/11/17/La-culture-in-vitro

et encore ceux la pour l'achat du milieu de culture et des materiels :
http://pagesperso-orange.fr/technivit/boutique.htm
http://www.natureetpaysages.fr/v2/product.php?id_product=738

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Jean-Bruno

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a mon avis le plus difficile n'est pas de trouver les produits, c'est plutot d'arriver à produire le milieu stérile de la zone travail, enfin c'est là tout mon problème...

On trouve les milieux de culture sur eBay.

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Quand le merle chante en mai, avril est fini !(Coluche).

Désolé, je n'ai pas eu le temps de répondre plus tôt
Il existe des colorants qui vont colorer spécifiquement les noyaux des cellules mais je ne pense pas qu'un particulier puisse avoir accès à ce genre de produit.

Je fais commander mes milieux chez Sigma (P6668) par le labo ou je bosse puis je le rembourse. Sigma-Aldrich ne vend pas aux particuliers. Les tarifs que tu as trouvés sont au minimum 2 fois plus cher que Sigma. et 5.00 € pour 200 ml de milieux c'est carrément prohibitif.

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T'emploierais quoi pour colorer le noyau ? Bleu de méthylène ? Lugol ?

Et comme milieu, tu emploies seulement le P6668 ou tu as aussi essayé les autres (Knudson, P1056 et autres )
?

Donc pas de moyens simples... Avec un microscope, on peut voir quelque chose ?


Et avec ce lien là, est ce que c'est le meme P6668 ?
http://orchidees.jimdo.com/boutique/mat%C3%A9riels/in-vitro/

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Jean-Bruno

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@François : Pour le colorant, je ne me souviens pas. Il faudrait que je demande aux cytologistes du labo
Sinon pour le milieu je me serts du Phytamax P6668 comme base et je modifie la recette en fonction de ce qui est décrit sur bigleaf ou the hybridizersforum.

@Jbd : un microscope a un pouvoir grossissant bien supérieur à une loupe binoculaire donc ça peut être utilisé. Et sinon, oui le milieu est bien celui-ci

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tu n'as pas besoin de de colorant spécial pour voir si tes graines sont stériles. Un coup d'oeil au microscope (ou une forte bino) et si tes graines sont "dodues" (en raison de la présence de l'embryon, une petite "boule"), c'est bon. les graines stériles sont vides.

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www.caladenia.net:toutes mes photos d'orchidées sauvages d'Australie occidentale