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| Auteur: | ion-ion [ Dim Aoû 25, 2013 6:31 pm ] |
| Sujet du message: | Recherche hotte |
Bonjour à tous. Je m'arrache les cheveux avec mes repiquages  Je contamine tout, je n'arrive pas à travailler dans la glove box. Je recherche une hotte à flux laminaire horizontal de petite dimension. Auriez-vous un plan pour en acheter une d'occasion ? Merci d'avance ! |
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| Auteur: | marine02 [ Dim Aoû 25, 2013 8:03 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
La méthode de repiquage ou les flasks en sont certainement la cause. Pas certaine que ce soit plus facile sous hotte, à moins que tu aies dejà travaillé sous cet environnement 
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| Auteur: | ion-ion [ Dim Aoû 25, 2013 8:10 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Eh oui, je travaille sous hotte tous les jours  Je suis dans la CIV. Ca explique peut-être que je sois incapable de travailler entravée dans la glove box 
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| Auteur: | marine02 [ Dim Aoû 25, 2013 8:21 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
OK, ça sera plus simple pour toi sous hotte alors. N'empêche que si on fait ce qu'il faut en glovebox, on n'a quasiment pas de contamination, à condition que les flasks soient saines au départ. c'est une autre façon de travailler 
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| Auteur: | fred8282 [ Dim Aoû 25, 2013 8:40 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Ton problème vient peut-être de la stérilisation des boîtes. Investis sur une cocote des USA qui coûte environ 120 euros avec le port. Ou, laisse plusieurs semaines reposer tes pots avant d'effectuer les repiquages. Bonne soirée fred |
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| Auteur: | ion-ion [ Dim Aoû 25, 2013 10:11 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Je suis sûre de n'avoir aucun problème avec les flask, elles datent de plusieurs semaines et zéro contam dans les boîtes neuves. Je sais que la contam vient de la manipulation, parce que je n'arrive pas à travaille dans la glove box, donc je travaille à la flamme, et même avec 3 lampes à alcool ce n'est pas suffisant
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| Auteur: | Kaylane [ Lun Aoû 26, 2013 6:41 am ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Décris-nous tes manip, y a forcément un truc qui cloche. |
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| Auteur: | Poliben [ Lun Aoû 26, 2013 9:34 am ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
ion-ion a écrit: donc je travaille à la flamme, et même avec 3 lampes à alcool ce n'est pas suffisant Le problème vient probablement de là Si ma mémoire est bonne, la flamme d'un lampe à alcool n'est pas assez chaude pour générer un cône de stérilité Il faut du gaz ou les trucs électriques prévus à cet effet. Au tout début, je semais sur ma cuisinière à gaz avec pas mal de contamination certes, mais ça fonctionnait à peu près. Sinon il y a la technique qu'utilise Alain Brochard, une grande casserole d'eau bouillante avec une grille posée dessus et tu travailles dans le flux de vapeur ... J'ai testé et si tu as des lunettes de vue (comme moi) c'est ingérable avec la buée qui se dépose sur les verres 
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| Auteur: | ion-ion [ Lun Aoû 26, 2013 6:50 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
| Oui j'imagine bien, je porte des lunettes de temps en temps, mais la plupart du temps j'ai des lentilles. Je crois que je vais tester ta méthode, j'avais vu des photos. Kaylane, je pense que le cône de stérilité est trop petit par rapport à la taille de ma boîte. J'utilise des boîtes en plastiques avec une grande ouverture, et à mon avis, c'est là qu'est le problème, c'est que je ne peux pas maintenir toute l'ouverture + le couvercle dans la zone de stérilité. M'en vais tester la casserole d'eau bouillante. Après, si je n'ai pas de bons résultats, je ferais appel à Papa Noël
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| Auteur: | Philippe13 [ Lun Aoû 26, 2013 7:32 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées !  J'ai toujours travaillé avec un simple aquarium posé sur le côté, sans flamme et je n'ai jamais eu que de très rares contaminations, uniquement sur les derniers flacons d'une série. Donc, c'est bien au niveau de la manipulation elle-même qu'il y a un problème ! |
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| Auteur: | Kaylane [ Lun Aoû 26, 2013 7:54 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Philippe13 a écrit: A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! J'ai toujours travaillé avec un simple aquarium posé sur le côté, sans flamme et je n'ai jamais eu que de très rares contaminations, uniquement sur les derniers flacons d'une série. Donc, c'est bien au niveau de la manipulation elle-même qu'il y a un problème ! +1 c'est pour ça que tu devrais nous décrire avec précision toutes les étapes |
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| Auteur: | marine02 [ Lun Aoû 26, 2013 8:45 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Ah voilà, tu ne nous avais pas tout dit. Tu travailles à la flamme. Perso j'utilisais un réchaud de camping, bleuet, et ça fonctionnait assez bien. Le souci, effectivement c'est qu'il faut travailler avec des contenants à col étroit pour le semis à la flamme. Paradoxalement par rapport à toi, je suis passé en glove box après, et j'y trouve un confort évident. Et une zone de stérilité bien plus sûre. A la flamme, il faut travailler très près et c'est bien plus dangereux.
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| Auteur: | ion-ion [ Mar Aoû 27, 2013 7:52 am ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Alors, la manip en elle-même : je nettoie mon plan de travail à l'alcool, les mains lavées + solution hydroalcoolique je dispose 3 lampes à alcool en triangle je flambe un bon moment une pince a bout plat que je laisse ensuite embout vers le haut dans le cône de stérilité d'une flamme j'ouvre un bocal a repiquer dans le un cone de stérilité, je chope un pti tas de protocormes avec la pince. Je repose la pince embout vers le haut avec ses protocormes collés au bout pour pouvoir refermer le bocal. J'ouvre un nouveau bocal et j'introduis les plantules. Tout ça en flambant les cols à chaque fois. Mais je pense que ça me vient pas de la pince, ou des plantules, parce que les contaminations se développent "a distance" des plantules, genre sur un côté, ou en plein milieu d'une partie de gélose stérile que je n'ai pas trifouillé avec ma pince. donc je vais tester la casserole d'eau chaude pour laisser ma boite et son couvercle dans une zone de stérilité. Qu'en pensez-vous? |
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| Auteur: | Kaylane [ Mar Aoû 27, 2013 10:17 am ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
j'en pense que ça manque d'eau de javel Je ne sais plus si tu avais acheté le kit chez moi ou non, mais si c'est le cas, relis bien la procédure.... Tu dois bosser sur un "lit" de javel. |
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| Auteur: | ion-ion [ Mar Aoû 27, 2013 1:34 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Philippe13 a écrit: A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! Ouiiiii ! ! Et un jour, j'ouvrirai un super méga espace de vente, avec tout plein d'orchidées, et tous les orchidoux seront invités à l'inauguration, et le champagne coulera à flots... Bon, allez, je redescends sur terre, et je vais tenter de repiquer mes derniers semis sans tout bousiller. Je vais tester le lit de javel aussi, merci kaylane ! |
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| Auteur: | Kaylane [ Mar Aoû 27, 2013 7:07 pm ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
ion-ion a écrit: Philippe13 a écrit: A croire que tout le monde a décidé de s'investir dans la production de masse d'orchidées ! Ouiiiii ! ! Et un jour, j'ouvrirai un super méga espace de vente, avec tout plein d'orchidées, et tous les orchidoux seront invités à l'inauguration, et le champagne coulera à flots... Bon, allez, je redescends sur terre, et je vais tenter de repiquer mes derniers semis sans tout bousiller. Je vais tester le lit de javel aussi, merci kaylane ! Relis bien la procédure et suis tout étape par étape. Au pire, si un jour tu veux une hotte, je te vendrais une des miennes 
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| Auteur: | ion-ion [ Mer Aoû 28, 2013 6:32 am ] |
| Sujet du message: | Re: Recherche hotte |
Kaylane a écrit: Au pire, si un jour tu veux une hotte, je te vendrais une des miennes Ca, c'est pas tombé dans l'oreille d'un sourd ! |
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