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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 5:12 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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Je me présente Xeran je ne suis pas nouveau sur le forum, mais pas très actif, mais je le suis plus sur l'autre et encore que :grat: Mais pour la culture in vitro c'est quand même ici que l'on trouve le plus de renseignements, donc voici pourquoi je viens à vous pour mes questions.

Voilà, après quelques mois de recherche et de lecture sur le forum, j'ai encore quelques questions dont je n’ai pas trouvé réponse.

Pour les pots dans lesquels je vais couler le milieu, genre des pots de confiture comme ceci, il me faudra faire un trou pour y mettre le pansement,il faut sûrement faire le trou avant le passage en cocotte, mais que mettre dessus pour empêcher l'eau de rentrer ?
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Pour la stérilisation des bocaux, j'ai vu plusieurs façons de faire .

Au four traditionnel, mais je ne suis pas trop chaud.
À la cocotte, ma première option.
Mais j'ai aussi l'occasion d'utiliser un four à vapeur professionnel qui monte en vapeur jusque 120° C, pensez-vous que cela fera l'affaire ?

Dernière question pour le moment : c'est que j'ai vu et on m'a conseillé d’améliorer le p6668 avec purée de pommes de terre, banane verte et sucre.

La pomme de terre et banane verte, je dois les mixers crus sans rien d'autre et additionner cela au moment de l'ébullition du p6668, c'est bien cela ?

Bien voilà, c'est les dernières incertitudes qui me restent avant de me lancer, merci d'avance à ceux que vont prendre le temps de me répondre.


Dernière édition par xeran le Mer Nov 14, 2012 4:54 pm, édité 1 fois.

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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 5:32 pm 
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Inscription: Mar Juil 10, 2007 1:51 am
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Bonjour,

Pour essayer de répondre dans l'ordre :

1- Pour les pansements, je ne pourrais pas aider car je n'utilise pas ça, mais des patchs en téflons microporeux qui ne se décollent pas à l'autoclavage.

2- Je ne connais pas le fonctionnement des fours à vapeur, mais si cela monte à plus de 120° C en chaleur humide, je serais tenté de dire que ça doit être utilisable.

3-Pour les milieux, je mélange tout à froid (milieu + purée + banane+ agar). Quand c'est bien homogénéisé je répartis dans les flacons et j'autoclave les flacons directement avec le milieu. C'est un gain de temps substantiel ;)

J'ai de très bons résultats en fonctionnant ainsi ;)
Bonne CIV...

Benoit

EDIT : En revanche le mix milieu + pomme de terre + banane, c'est uniquement pour les repiquages, pas pour les semis ;)

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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 6:05 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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Merci Benoit pour le complément de renseignements.

Aurais-tu un lien pour tes patchs en téflons micro poreux STP ?

Et donc toi quand tu sèmes, tu utilises le p6668 pur + agar, rien d'autre, même pas le sucre ?


Quand tu fais ton milieu, c'est : eau distillée froide, poudre (p6668) et le reste toujours à froid, c'est bien cela ?


Encore une question : j'ai vu que pour les paphios, le p6668 fonctionne moins bien, c'est vrai ?


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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 6:24 pm 
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Inscription: Mar Juil 10, 2007 1:51 am
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Voilà : http://www.tissuequickplantlabs.com/amdpg5c.htm

C'est pas donné mais réutilisable ;)

Pour les semis (de Phals), j'utilise les milieux qui sont donnés sur bigleaf, j'ai mis le lien dans un autre sujet.

De mémoire, c'est 13.5 g/l de P6668 + 5 g/l de sucre.

Oui, je mélange tout à froid.

Je n'ai pas une grande expérience de semis de paphio, donc je ne sais pas, mais Cubzak doit pouvoir te répondre, il est ZE spécialiste du semis de paphio ici ;)

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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 6:49 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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Je viens d'aller voir le site. Je ne trouve pas leur prix pour les patchs en téflon micro-poreux. C'est là que tu les commandes ?


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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 6:56 pm 
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Inscription: Mar Juil 10, 2007 1:51 am
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Oui je les avais commandés là, mais c'était il y a 2-3 ans, je regarderai la facture pour te donner une idée, mais je pense qu'il faut leur envoyer un mail pour leur demander les prix actuels.

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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 7:08 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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J'ai trouvé le prix pour les pots avec les patchs en téflon micro-poreux ça oui, mais pas les patchs seuls, je vais leur envoyer un mail.

J'ai vu que tu travaillais en labo, donc tu pourrais peut-être me répondre : j'ai une une hotte à flu laminaire de récup, le filtre hepa il est bon combien de temps ?

J'ai même vu qu'elle avait une lampe à UV qui ne fonctionne pas pour le moment, elle sert à désinfecter, quelles sont les précautions à prendre pour la lampe ?

Je vais te faire une photo demain de la hotte, tu me diras ce que tu en penses.


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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 7:53 pm 
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Citation:
Je n'ai pas une grande expérience de semis de paphio, donc je ne sais pas, mais Cubzak doit pouvoir te répondre, il est ZE spécialiste du semis de paphio ici


Tu peux t'adresser à Etienne aussi... :wink:

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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 8:17 pm 
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C'est pas spécialement que je veux semer des pahpios, mais dans les graines que j'ai commandées pour faire mes 1er tests, j'ai commandé des paphios et c'est après que j'ai lu que le milieu n'est pas forcément le même.

Moi c'est plutôt des Lycaste et Angulocaste que j'ai envie de croiser.


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MessagePosté: Jeu Nov 08, 2012 9:26 pm 
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Ca y est, tu te lances. Effectivement, Lycaste et Angulocaste, le mieux est encore de le faire toi-même. Tu verras, l'expérience est passionnante.

Bonne CIV ! :)

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MessagePosté: Ven Nov 09, 2012 4:13 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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Petite question pour les gens qui utilisent les pansements, ils résistent à l'autoclave ?


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MessagePosté: Ven Nov 09, 2012 7:19 pm 
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Inscription: Mar Déc 28, 2010 8:34 am
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Hello, ils résistent à la cocotte, donc oui.

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¤ A quoi ça sert d'avoir des ailes si tu ne peux pas sentir le vent sur ton visage ? ¤


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MessagePosté: Sam Nov 10, 2012 8:58 am 
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Localisation: Montauban
Bonjour,

Il y aussi le sparadrap micropore surgical tape de 3M que tu trouves en pharmacie à max 2 euros 25 mm X 9.14 m, tu auras de quoi faire.

Je perce un trou de 1.5 à 2 mm et je mets un petit morceau de ce sparadrap, puis après la cuisson je recolle une deuxième épaisseur.

C'est économique et efficace.

Bonne journée
fred

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« Quand vous plantez une graine une fois, vous obtenez une seule et unique récolte. Quand vous instruisez les gens, vous en obtenez cent. »

Confucius


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MessagePosté: Dim Nov 11, 2012 10:46 pm 
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Inscription: Mer Mai 28, 2008 8:34 am
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Merci Fred pour le renseignement, je note.


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MessagePosté: Lun Nov 12, 2012 8:23 pm 
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fanou13 a écrit:
Citation:
Je n'ai pas une grande expérience de semis de paphio, donc je ne sais pas, mais Cubzak doit pouvoir te répondre, il est ZE spécialiste du semis de paphio ici


Tu peux t'adresser à Etienne aussi... :wink:


Merci Fanou, mais on ne peut pas dire que je sois un spécialiste du semis de paphio.... J'ai quelques plantules qui poussent tant bien que mal, mais c'est vrai que ce qui a marché pour moi est un peu différent de la recette de base que donne poliben et qui marche super bien en général. Il faut que je regarde mes notes pour les détails, mais si Cubzak passe dans le coin.....

Citation:
J'ai vu que tu travaillais en labo, donc tu pourrais peut-être me répondre : j'ai une une hotte à flu laminaire de récup, le filtre hepa il est bon combien de temps ?

J'ai même vu qu'elle avait une lampe à UV qui ne fonctionne pas pour le moment elle sert à désinfecter, quelles sont les précautions à prendre pour la lampe ?


Le filtre Hepa peut durer plusieurs années. le risque principal est le colmatage et également la contamination de la face du côté du plan de travail.
Pour le risque de colmatage, il faut mettre un pré-filtre avant le filtre Hepa. Pour le risque de conta, en labo, on laisse la ventilation en route en permanence (mais moins fort que durant le travail) ce qui évite que des spores viennent se coller dessus. Tu peux aussi fermer hermétiquement la hotte lorsque tu ne t'en sers pas puis la mettre en route pendant 15-20 minutes avant de travailler dessous.
La lampe UV est aussi un bon moyen de stériliser l'aire de travail en l'allumant 15 minutes (mais ne sert pas à grand-chose si le filtre est contaminé). Par contre, interdiction stricte d'y être exposé directement ou pire de la regarder : risque de brûlures graves ! Donc tu peux mettre la lampe en route lorsque la hotte est fermée.

Ensuite, si tu as une hotte qui fonctionne, tu peux d'abord stériliser ton milieu avant de le répartir dans tes pots stériles : ça te permet d'avoir un milieu plus homogène d'un pot à l'autre. Mais il faut bien travailler de manière stérile.....

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MessagePosté: Mar Nov 13, 2012 1:39 pm 
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Merci d'avoir répondu Etienne, j'avais complètement oublié :oops:

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MessagePosté: Mar Nov 13, 2012 2:49 pm 
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Il n'y a pas de mystère, pour la culture in vitro quel que soit le genre, plus les graines sont fraîches et mieux ça fonctionne, a condition que les graines soient également viables, après chacun à sa petite recette, mais c'est la cuisine, masterchef.
Tout a été largement diffusé, y compris sur ce site :stir:


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MessagePosté: Mar Nov 13, 2012 11:35 pm 
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Un grand merci à vous deux pour ce complément de renseignement.

Y a-t-il un moyen bien précis pour nettoyer légèrement le filtre ?


Je vais faire une photo de la hotte pour vous faire voir.


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MessagePosté: Mer Nov 14, 2012 12:13 am 
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Localisation: Evry
Pour nettoyer le filtre ... pas vraiment. Tu peux essayer de pulvériser de l'alcool à 70° avec la hotte en marche...
Je pense que le meilleur moyen sera de faire tourner la hotte pendant quelques heures avec quelques coups de lampe UV. Puis ensuite de vérifier sa propreté en laissant des bocaux de milieu ouverts pendant 1 h ou 2 dans la hotte en marche pour voir s'ils restent stériles. Par contre, prévois de mettre plusieurs bocaux sur toute la largeur de la hotte pour être sûr qu'il n'y a plus de contamination nulle part.

Autre point, la puissance de la soufflante est importante : trop faible ou trop fort et la hotte ne marchera pas bien.

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MessagePosté: Mer Nov 14, 2012 9:09 am 
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Inscription: Mer Oct 27, 2010 8:15 am
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Heeeuuuuuu pardonnez mon ignorance, mais les pansements, c'est pour quoi faire? J'ai beau tourner et retourner la question dans ma tête, je vois pas :grat: :P


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